但,16s测序缺点不少。
它只能反映菌群总量变化、无法区分活菌死菌,而且采样的过程中难免会破坏肠道结构。
这种破坏,对于讲究严格对照实验的科研项目来说,是很严重的不确定性因素。
而许秋选用的FIsh活体成像,却避开了这三个缺点,甚至将其转化为了优点。
先,它可以实时观测菌-黏液空间的关系,不再机械式地只能查看菌群总量,而是能综合分析!
此外由于有rRna探针的存在,它能做到知检测活菌,这也是它被称为“FIsh活体成像”的关键!
最后一点,则是能够无创动态追踪同一部位,可以完美地查看任何区域在任何时候的所有变化!
而在这堪称完美的实验设计之下,结果很快出炉。
最终现——Vns组,红色的阿克曼菌迅聚集在绿色的黏液层深部。
菌密度达到了足足八倍!
而假手术组,也即对照组,细菌却依旧随机分散于肠腔,没有出现任何菌群的富集现象。
这让众人感到无比振奋!
“在Vns的作用下,阿克曼菌真的聚集在一块了!”
“而且短短十几分钟内,菌群密度就已经达到了八倍,若是一个小时、十个小时,恐怕八十倍、八百倍都问题不大!”
菌群的繁殖与生长,呈现指数级生长。
一个变两个,两个变四个……越到后面,数量越爆炸,差距也越大。
当然,真实的人体环境中,不可能存在无限制的暴涨。
彭月娇体内的一千倍,或许就已经是她的肠道环境所能容纳的极限了。
总之,眼下的实验已然证明,Vns确实能够特异性地增加阿克曼菌!
“还有最后一点!”
此时,众人都亢奋起来。
这一步,就需要用到基因编辑动物了。
其一是杯状细胞特异性敲除鼠,敲除了肠上皮muc2。
即,剥夺黏液。
这是用来证明,黏液是阿克曼菌增值的必要条件。
其二则是胆碱能神经元激活鼠,即hm3dq-dReadd转基因鼠、注射激活神经元……
很快,实验开始。
先是剥夺黏液!
针对mus手术,最后观察到,阿克曼菌并没有增加!
这意味着,黏液是阿克曼菌增值的必要条件。
随后,再造胆碱能通路!
向mu-muc2,此为特异性在神经元表达黏液素。
随后再进行Vns手术。